लिक्विड क्रोमैटोग्राफी कॉलम में डेड टाइम की गणना कैसे करें

लेखक: Charles Brown
निर्माण की तारीख: 9 फ़रवरी 2021
डेट अपडेट करें: 22 नवंबर 2024
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अध्याय12-1
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विषय

अज्ञात घटक की पहचान निर्धारित करने के लिए रासायनिक प्रयोगशालाओं में क्रोमैटोग्राफी का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। यह घटक कॉलम रैपिंग सामग्री के माध्यम से बहता है और कणों के साथ बातचीत करता है। नमूने में कणों और घटकों के बीच की बातचीत उनके बीच आकर्षण या घुलनशीलता पर आधारित होती है। अणु जिनकी म्यान सामग्री के कणों के साथ कोई संपर्क नहीं है, बिना बाधा के इसके माध्यम से गुजरने की अनुमति है। अणुओं के लिए इंजेक्शन बिंदु से सिस्टम में गैर-प्रतिक्रियाशील अणु के अधिकतम शिखर पर पारित होने के लिए आवश्यक समय स्तंभ का मृत समय है।

चरण 1

अज्ञात नमूने को उस यौगिक की थोड़ी मात्रा के साथ फिर से लागू करें जिसे स्तंभ सामग्री द्वारा बनाए नहीं रखा गया है। यौगिक कॉलम में लपेटने वाली सामग्री के साथ बातचीत किए बिना कॉलम से गुजरेगा।


चरण 2

नमूना के लगभग 20 microliters के साथ सिरिंज लोड करें और इंजेक्शन बंदरगाह में सिरिंज सुई डालें। वाल्व में सिरिंज खाली करके वाल्व से नमूना लूप लोड करें।

चरण 3

क्रोमैटोग्राफी उपकरण चालू करें और मोबाइल चरण शुरू करें। यह चरण उपकरण के माध्यम से बहता है और स्तंभ और डिटेक्टर के माध्यम से नमूना लेता है जो अपशिष्ट अपशिष्ट में समाप्त होता है।

चरण 4

वाल्व को सक्रिय करें, जो नमूना को द्रव प्रवाह पथ में प्रवेश करने की अनुमति देता है। यह नमूना घटकों को स्तंभ के शीर्ष पर लोड करता है और अलगाव शुरू होता है।

चरण 5

डिटेक्टर के एमिटर सिग्नल की निगरानी करें और क्रोमैटोग्राफ में पहले शिखर की पहचान करें। इंजेक्शन समय और पहले शिखर की अधिकतम के बीच का अंतर, सुदृढीकरण घटक द्वारा दर्शाया गया, मृत समय है।

चरण 6

इंजेक्शन बिंदु और पहली चोटी की अधिकतम ऊंचाई के बीच की दूरी को मापें। कागज की गति या मृत समय को खोजने के लिए अक्ष द्वारा दूरी को गुणा करें।