विषय
तपेदिक एक संक्रामक रोग है जो जीवाणु माइकोबैक्टीरियम तपेदिक के कारण होता है और यह एक श्वसन रोग है जिसमें फेफड़े में कंद संरचनाओं, परिगलन, फोड़े, फाइब्रोसिस और कैल्सीफिकेशन की विशेषता होती है। यह गुर्दे, लिम्फ नोड्स, हड्डियों, जोड़ों और त्वचा को भी संक्रमित कर सकता है।
इस बैसिलस की प्राथमिक प्रयोगशाला निदान में माइक्रोस्कोप के तहत बैक्टीरिया की कल्पना करने के लिए इसे धुंधला करना शामिल है। पसंद का नमूना श्वसन संक्रमण या वास्तविक ऊतक के नमूने की पहचान करने के लिए बलगम या ब्रोन्कोएलेवल लैवेज है।
शरीर क्रिया विज्ञान
माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस एक रॉड के आकार का जीव (बेसिली), गैर-मोबाइल, गैर-अनिवार्य बीजाणु है। यह जीवाणु लंबाई में 0.4x3 माइक्रोमीटर की माप करता है और हर 15 से 24 घंटे में द्विआधारी विखंडन (प्रजनन कोशिका का विभाजन) से गुजरता है, जिसे अन्य जीवाणुओं की तुलना में धीमा माना जाता है। इस वजह से, माइकोबैक्टीरियम को संस्कृति माध्यम में प्रदर्शित होने में नौ सप्ताह तक का समय लग सकता है।
यह जीव यूवी प्रकाश और गर्मी (जैसे पास्चुरीकरण) के प्रति संवेदनशील है, लेकिन रासायनिक कीटाणुनाशक का प्रतिरोध करता है।
ग्राम दाग
माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस को वास्तव में ग्राम पॉजिटिव या ग्राम-नकारात्मक के रूप में वर्गीकृत नहीं किया जा सकता है। यह वर्गीकरण एक जीवाणु की कोशिका भित्ति में पेप्टिडोग्लाइकन की मात्रा के आधार पर बनाया गया है। एक ग्राम-पॉजिटिव प्रजाति में इस अणु की मोटी परत होती है (लगभग 90%), जबकि एक ग्राम-नकारात्मक प्रजाति में एक पतली परत होती है (5% से 20% तक)। ग्राम दाग कोशिका भित्ति में प्रवेश कर जाते हैं और उसमें रासायनिक घटकों को बांध देते हैं। माइक्रोस्कोप के तहत, दाग वाले बैक्टीरिया बैंगनी या गुलाबी हो जाएंगे।
माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस के साथ, सेल की दीवार पेप्टिडोग्लाइकन से बनी होती है, लेकिन जटिल लिपिड भी होते हैं जो ग्राम डाई प्रवेश को रोकते हैं। सेल की दीवार भी एसिड या अल्कोहल द्वारा मलिनकिरण का विरोध करती है, यही कारण है कि माइकोबैक्टीरियम को "एसिड-प्रतिरोधी" कहा जाता है। सेल वॉल लिपिड मायकोलिक एसिड, स्ट्रिंग फैक्टर और डी-मोम हैं। यदि बैक्टीरिया को दाग दिया जाना था, तो कोशिकाएं बहुत कम रंग के साथ ग्राम-पॉजिटिव या थोड़ा पीला दिखाई देंगी।
बैक्टीरिया को देखने के लिए, विशेष दाग, जैसे कि ऐमारिन या ज़ील-नीलसन के दाग का उपयोग करना चाहिए।
Aumarine-rhodamine दाग
Auramine-rhodamine का उपयोग करने वाली प्रक्रिया एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत मायकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस की कल्पना करने के लिए एक पीले फ्लोरोसेंट डाई का उपयोग करती है। पोटेशियम परमैंगनेट या एक्रिडिन ऑरेंज का उपयोग कंट्रास्ट डाई के रूप में किया जा सकता है। लेंस के नीचे, बैक्टीरिया कोशिकाएं हरे रंग की दिखाई देंगी।
Auramine-rhodamine डाई Zhiel-Neelson की तुलना में अधिक संवेदनशील और अधिक आर्थिक रूप से व्यवहार्य है।
ज़ेहल-नील्सन रंग
ज़ेहल-नील्सन का दाग वैज्ञानिकों फ्रेज़ ज़ेहल और फ्रेडरिक नीलसन द्वारा बनाया गया था, और गर्म कार्बो-फ़्यूचिन, एसिड-अल्कोहल की एक उच्च सांद्रता और एक विपरीत डाई, जैसे हरी मैलाकाइट या मिथाइलीन ब्लू का उपयोग करता है। एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत, बैक्टीरिया कोशिकाएं उज्ज्वल गुलाबी दिखाई देंगी।
Ziehl-Neelson डाई माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस और माइकोबैक्टीरियम लेप्रा की प्रारंभिक पहचान के लिए उत्कृष्टता का मानक है।
Agar
माध्यमिक से सूक्ष्म पहचान, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस को एक विशेष अगर संस्कृति पर उगाया जाना चाहिए। लोवेनस्टीन-जेन्सेन जिलेटिन में जटिल कार्बनिक पदार्थ (जैसे अंडे और आलू), लवण, ग्लिसरॉल और मैलाकाइट ग्रीन (जो अन्य बैक्टीरिया को रोकता है) है। एंटीबायोटिक्स को दूषित सूक्ष्मजीवों को और अधिक बाधित करने के लिए जोड़ा जा सकता है। नमूना इस अगर पर रखा गया है, और बैक्टीरिया तीन से नौ सप्ताह में बढ़ता है।
अल्बुमिन और बायोटिन जैसे एक पोषक तत्व संस्कृति समाधान का उपयोग लक्ष्य बैक्टीरिया की सबसे छोटी मात्रा के विकास का समर्थन करने के लिए भी किया जा सकता है। इसे मिडिलब्रुक 7 एच 9 (या 7 एच 12) के रूप में जाना जाता है।
दोनों मीडिया में, उपनिवेश छोटे, पॉलिश, हल्के भूरे रंग के उपनिवेश के रूप में दिखाई देंगे।
उन्नत तकनीक के साथ, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस अब एक स्वचालित रीडर का उपयोग करके उगाया जा सकता है। मिडिलब्रुक 7 एच 9 मध्यम और एक फ्लोरोसेंट संकेतक यौगिक का एक तरल समाधान विकास की निगरानी और सकारात्मक या नकारात्मक संक्रमण की रिपोर्ट करने के लिए उपयोग किया जाता है।