विषय
पोषक तत्व शोरबा का उपयोग बैक्टीरिया के संवर्धन के लिए किया जाता है, जैसे एस्चेरिचिया कोलाई। इस शोरबा के लिए व्यंजन बैक्टीरिया की प्रजातियों के आधार पर भिन्न होते हैं, साथ ही आनुवंशिक संशोधनों की उपस्थिति, जैसे कि एंटीबायोटिक दवाओं के लिए प्रतिरोध। शोरबा को अगर-अगर के साथ जोड़ा जा सकता है, जो बैक्टीरिया को अलग उपनिवेश बनाने की अनुमति देता है, जबकि तरल संस्कृति में वे बस मात्रा में फैल जाते हैं। यह एक बुनियादी तकनीक है, लेकिन जीन क्लोनिंग या सूक्ष्मजीवविज्ञानी assays जैसे उन्नत तरीकों के लिए आवश्यक है। यह कागज मानता है कि एस्चेरिचिया कोलाई के प्रयोगशाला उपभेदों को लुरिया शोरबा अगर प्लेट (या पेट्री डिश) में सुसंस्कृत किया जाएगा।
दिशाओं
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10 ग्राम बैक्टीरिया ट्रिप्टोन, 5 ग्राम खमीर निकालने, 5 ग्राम सोडियम क्लोराइड, 15 ग्राम अगर या अग्रोसे और 1N सोडियम हाइड्रॉक्साइड के 1 मिलीलीटर को मापें। 1 लीटर माध्यम प्राप्त होने तक आसुत जल के एक बाँझ, आटोक्लेव मात्रा के साथ उन्हें मिलाएं। 25 मिनट के लिए बोतलों या अर्ध-कैप्ड फ्लास्क में माध्यम को आटोक्लेव करें। अभिकर्मकों को जोड़ने से पहले इसे लगभग 50 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा करने की अनुमति दें जो उच्च गर्मी से नष्ट हो सकते हैं, जैसे कि एंटीबायोटिक्स या अन्य पोषण पूरक।
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आटोक्लेव्ड माध्यम को 50 ° C तक ठंडा करने दें और 45 ° C से कम नहीं होने दें, क्योंकि आगर डालने से पहले कंटेनर से चिपक जाएगा। बाँझ पेट्री व्यंजन प्राप्त करें और पूरे सतह क्षेत्र को कवर करने के लिए पर्याप्त डालें और कम से कम उनकी गहराई को आधा करें। ओवरफिलिंग से बचें, और अधिमानतः अगर प्लेट के ऊपरी किनारे तक पहुंचने न दें। एक बाँझ वातावरण (उदाहरण के लिए, एक लामिना का प्रवाह कक्ष के तहत) में जमने के लिए प्रतीक्षा करें, कवर खुला और हुड के एक कोने को छोड़कर।
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प्लेटों को सुखाएं। यद्यपि उनका उपयोग ठोस होते ही किया जा सकता है, कुछ नमी अग्र की सतह पर मौजूद होगी, जो बैक्टीरिया की उपनिवेशों को पर्याप्त रूप से पालन करने से रोकेंगी। इसलिए किसी भी बैक्टीरिया को लागू करने से पहले प्लेटों को सूखना बेहतर होता है, उदाहरण के लिए उन्हें कुछ दिनों के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ कर या एक लामिना का प्रवाह कक्ष के नीचे या 37 डिग्री सेल्सियस इनक्यूबेटर में आधे घंटे के लिए।
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प्लेटों को स्टोर करें। सूखे प्लेटों को उल्टा (उल्टा) स्टैक किया जाना चाहिए और उनकी मूल पैकेजिंग में पुन: स्थापित किया जाना चाहिए, टेप से सील कर दिया जाना चाहिए और उन्हें प्रकाश से बचाने के लिए पन्नी में या एक उपयुक्त कंटेनर में लपेटा जाना चाहिए। हमेशा तैयारी की तारीख लिखें और उपयोग से बचें अगर प्लेटें दो महीने से अधिक पुरानी हैं।
युक्तियाँ
- जीवाणुरोधी वायु प्रदूषण को मध्यम में प्रवेश करने और बढ़ने से रोकने के लिए एक बाँझ वातावरण में (उदाहरण के लिए, एक लौ या एक लामिना का प्रवाह हुड के तहत) पिछले कई चरणों के रूप में प्रदर्शन करें।
आपको क्या चाहिए
- 10 ग्राम बैक्टो-ट्रिप्टोन
- खमीर निकालने के 5 ग्राम
- 5 ग्राम NaCl
- 1N NaOH का 1 मिलीलीटर
- 15 ग्राम अगर या अग्रोसे
- पूरक, जैसे कि एंटीबायोटिक्स या गैलेक्टोसाइड्स
- आटोक्लेव
- प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ
- पेट्री प्लेटें
- लामिना का प्रवाह
- बन्सन नोजल
- आटोक्लेव और उपभोग्य
- तराजू और उपभोक्ता उत्पाद